顯微鏡是科研領(lǐng)域不可或缺的儀器之一。顯微鏡主要應(yīng)用在生物學(xué)領(lǐng)域,尤其是電子顯微鏡的發(fā)明,引發(fā)了生物學(xué)科的一場革命,使得細(xì)胞、病毒、細(xì)菌等微生物進入了人們的視線,讓人們對這個世界有了新的認(rèn)識。此外,顯微鏡在物理、化學(xué)等領(lǐng)域也有著十分重要的應(yīng)用??傮w來說,顯微鏡的出現(xiàn),使得人們打開了微觀世界的大門,給醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、物理學(xué)等領(lǐng)域的發(fā)展提供了可能。
發(fā)展到如今,顯微鏡技術(shù)已經(jīng)十分成熟,分辨率不斷提升,人們可以觀測到的極限被不斷超越。2006年,基于單分子定位的超分辨顯微成像技術(shù)被提出并迅速發(fā)展,該技術(shù)利用特殊熒光分子的光開關(guān)特性,結(jié)合單分子成像和質(zhì)心擬合算法,把熒光顯微鏡的分辨率提高了一個數(shù)量級。利用該技術(shù),還解析了許多未知的細(xì)胞納米結(jié)構(gòu),提升了對細(xì)胞結(jié)構(gòu)的認(rèn)知。
但受定位原理的限制,其軸向分辨率比側(cè)向低2-3倍,影響了其三維解析能力和應(yīng)用。近日,中國科學(xué)院生物物理研究所發(fā)布文章,顯示中國科學(xué)院院士、生物物理所研究員徐濤課題組與研究員紀(jì)偉課題組提出了一種軸向單分子定位成像新技術(shù),并研制出新型干涉定位顯微鏡(ROSE-Z),把單分子定位成像的軸向分辨率提升到納米尺度。
干涉定位顯微鏡能提供高分辨率三維解析能力,且這種三維解析能力是現(xiàn)有柱面鏡成像方法所無法實現(xiàn)的。通過干涉定位顯微鏡的高分辨率三維解析能力,實現(xiàn)了對細(xì)胞內(nèi)微管直徑約40-50 nm中空結(jié)構(gòu)的解析。同時,研究團隊在干涉定位顯微鏡的基礎(chǔ)上擴展了多色成像和厚樣品成像功能,對細(xì)胞樣品進行了納米精度三維雙色成像,并驗證了細(xì)胞厚樣品成像能力。
該方法不僅具備良好的軸向分辨率,還有很高的可擴展性、操作便捷性,為細(xì)胞內(nèi)三維納米結(jié)構(gòu)的研究提供了良好的研究工具。
該項目受到國家重點研發(fā)計劃、國家自然科學(xué)基金委、中國科學(xué)院戰(zhàn)略性先導(dǎo)科技專項(B類)"生物大分子復(fù)合體結(jié)構(gòu)與功能的跨尺度研究"及北京市科委等資助,目前被發(fā)表于Nature Methods雜志。